不同脱细胞方案制备主动脉细胞外基质支架的比较研究

• 作者: 倪海燕 叶飞 吴剑 孟明耀 李亚雄 蒋立虹 蒲磊
• 来源期刊: 中国修复重建外科杂志
• 关键词: 血管组织工程 支架材料 细胞外基质 脱细胞 猪 大鼠
• 年，卷（期）: 2014,（11）
• 所属期刊栏目: 干细胞与组织工程
• 页码范围: 1413-1421
• 页数: 9页
• 语种: 中文
• DOI: 10.7507/1002-1892.20140305

摘要

目的 应用不同方法对猪升主动脉进行脱细胞,从脱细胞有效性、细胞外基质破坏、生物力学和组织相容性等方面进行综合比较,以期获得适宜的组织工程血管支架.方法 取市售猪升主动脉30根随机分成6组(n=5),分别行以下脱细胞处理:A组0.1％胰蛋白酶/0.02％EDTA/PBS,B组1％Triton X-100/0.02％EDTA/蒸馏水,C组1％脱氧胆酸钠/蒸馏水,D组0.5％脱氧胆酸钠/0.5％SDS/蒸馏水,E组1％脱氧胆酸/蒸馏水;F组未行脱细胞处理,作为对照.观察各组支架大体结构,行HE染色观察支架显微结构和脱细胞有效性,DNA定量分析评价脱细胞效率;免疫组织化学染色观察Ⅰ型胶原和弹性蛋白损伤;扫描电镜观察内膜表面结构,测定生物力学性能.取90只SD大鼠随机分为6组(n=15),于腹壁肌内分别植入各组支架,术后7、14、28 d行HE染色评价支架免疫原性和组织相容性.结果 HE染色及DNA定量分析示,仅A、D组支架完全去除细胞成分.A组Ⅰ型胶原表达量显著低于其余各组(P＜0.05),基底膜破坏严重,生物力学性能下降,最大应力和抗张强度显著低于其余各组(P＜0.05),断裂伸长率显著高于其余各组(P＜0.05).D组Ⅰ型胶原破坏较B、C、E、F组严重(P＜0.05),但基底膜完整,生物力学性能接近于F组(P＞0.05).植入大鼠体内实验显示,D组支架免疫原性和组织相容性明显优于其余各组,炎性细胞浸润程度轻(P＜0.05).结论 采用0.5％脱氧胆酸钠/0.5％SDS/蒸馏水对猪主动脉进行脱细胞,获得的细胞外基质支架具有用于构建组织工程血管的潜能.