皮肤分枝杆菌DNA提取方法比较分析

• 作者: 姜海琴 孙建方 崔盘根 王洪生 闫桢桢
• 来源期刊: 中华皮肤科杂志
• 关键词: 分枝杆菌属 组织提取物 DNA提取方法
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报道
• 页码范围: 423-425
• 页数: 3页
• 字数: 2823字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0412-4030.2014.06.016

摘要

目的 比较分枝杆菌DNA提取的常用方法.方法 分别采用传统的冻融法和两种试剂盒(A、B)对不同浓度结核分枝杆菌、麻风分枝杆菌和耻垢分枝杆菌纯菌悬液及模拟标本进行总DNA提取.通过检测DNA纯度和PCR产物比较3种方法的提取效果,并应用临床皮肤组织标本进一步验证.结果 3种方法提取的分枝杆菌DNA均能用于PCR检测.试剂盒A获得的DNA纯度最高,冻融法其次,试剂盒B杂质最多;灵敏性检测显示3种方法可检测出的纯菌悬液最低浓度皆为102菌细胞/ml;对于模拟标本,在103菌细胞/ml时检出率为100％,在102菌细胞/ml时试剂盒A、B和冻融法检出率分别为60％(12/20)、55％(11/20)、55％(11/20);临床标本检测结果提示,试剂盒B可用于石蜡标本DNA的提取,对分枝杆菌感染组织提取率同其它两种方法基本一致.结论 试剂盒A通过多次过柱洗涤可快速获得分枝杆菌的优质基因组DNA,为实验研究及临床检测的首选;试剂盒B单次试剂处理除适用于石蜡标本提取DNA外,可用于新鲜组织标本的协同检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王洪生	中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所	49	123	5.0	7.0
2	孙建方	中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所	247	484	9.0	13.0
3	崔盘根	中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所	72	283	9.0	11.0
4	闫桢桢	中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所	6	11	2.0	3.0
5	姜海琴	中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所	3	6	2.0	2.0