shRNA沉默环指蛋白146基因对非小细胞肺癌细胞迁移、侵袭及其相关蛋白表达的影响

• 作者: 徐慧慧 惠林萍 李锐 王恩华 王睿 邱雪杉 高英
• 来源期刊: 现代肿瘤医学
• 学科: 医学
• 关键词: 非小细胞肺癌 RNF146 E3泛素连接酶 迁移 侵袭
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 论著 -- 基础研究
• 页码范围: 1245-1249
• 页数: 5页
• 分类号: R73-36﹢2|R734.2
• 字数: 3766字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-4992.2014.06.05

摘要

目的：shRNA沉默环指蛋白146（RNF146）基因，观察非小细胞肺癌细胞中RNF146沉默对肺癌细胞迁移和侵袭及其相关蛋白表达的影响。方法：逆转录聚合酶链反应（ RT-PCR）和Western blot方法用于筛选RNF146高表达肺癌细胞系。构建shRNA-RNF146真核表达载体，瞬时转染A549和H1299肺癌细胞，West-ern blot检测转染效率。划痕实验评价肺癌细胞体外迁移能力；Buyden小室实验检测肺癌细胞体外侵袭能力。Western blot检测肺癌细胞中迁移和侵袭相关蛋白的表达。结果：RT-PCR和Western blot方法筛选RNF146高表达肺癌细胞系，显示 A549和 H1299细胞中 RNF146蛋白均高于其它细胞系。shRNA -RNF146转染A549和H1299细胞系后，划痕实验显示转染组细胞24小时迁移率明显低于空载体组和未转染组（ P＜0.01）。Buyden小室实验结果表明转染组比空载体组和未转染组穿膜细胞数目明显减少（ P＜0.05）。West-ern blot检测与细胞迁移和侵袭相关的调控蛋白（ MMP2、MMP7、MMP9、RhoA、RhoB、RhoC、Rock1、TIMP-1等）的表达情况，结果显示干扰 RNF146后 A549细胞中 MMP2和 MMP7表达明显减少，而 MMP9、RhoA、RhoB、RhoC、Rock1、TIMP-1等蛋白的表达变化不明显。结论：RNF146可能通过调控MMP2和MMP7的蛋白水平促进肺癌细胞迁移和侵袭。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邱雪杉	中国医科大学基础医学院病理教研室及附属第一医院病理科	75	443	11.0	15.0
2	王睿	中国医科大学附属第四医院病理科	29	106	6.0	9.0
3	惠林萍	中国医科大学附属第四医院中心实验室	16	69	5.0	8.0
4	高英	中国医科大学附属第四医院病理科	40	118	7.0	9.0
5	李锐	中国医科大学附属第四医院病理科	7	23	3.0	4.0
6	徐慧慧	中国医科大学附属第四医院病理科	9	14	3.0	3.0