烟粉虱全基因组DNA四种提取方法的比较

• 作者: 万方浩 吕志创 戴恬美
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: DNA提取 烟粉虱 KAc法 氯仿-异戊醇法 盐析法 苯酚法
• 年，卷（期）: 2014,（8）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 70-75
• 页数: 6页
• 语种: 中文

摘要

获得大量、高质量的全基因组DNA是在DNA水平上研究许多生物的分子机制的基本前提。微小昆虫由于其体型微小，单头提取DNA浓度低，无法满足部分试验所需。为寻找一种方便、快捷、高效的全基因组提取方法，参考国内外单头微小昆虫基因组DNA提取常用方法，以烟粉虱为研究材料，选取醋酸钾（KAc）法、盐析法、氯仿-异戊醇法和苯酚提取法四种方法进行多头烟粉虱的全基因组DNA提取。通过微量核酸蛋白分析仪、基因组DNA直接琼脂糖凝胶电泳、甲基化敏感扩增多态性（Methylation sensitive amplification polymorphism，MSAP）引物扩增产物的琼脂糖凝胶电泳对DNA样品进行检测，比较提取DNA的产量、质量，并综合分析各提取方法所需时间及所用试剂的毒性大小。结果表明，盐析法提取的DNA平均浓度为521 ng/μL，纯度能满足分子检测要求，用MSAP引物能得到较好的扩增结果，相比其它方法，盐析法更简便、快速且无毒。因此盐析法是多头烟粉虱全基因组DNA提取的最佳方法。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	万方浩	中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点研究室	234	5754	37.0	65.0
5	吕志创	中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点研究室	7	54	4.0	7.0
6	戴恬美	中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点研究室	1	4	1.0	1.0