杀虫基因Cry1 Ab的合成、表达及其抗虫性鉴定

• 作者: 岳润清 燕树锋 铁双贵 韩小花 齐建双
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 生物学
• 关键词: Cry1Ab 人工合成 原核表达 玉米螟 抗虫鉴定
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 页码范围: 131-135
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 5072字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7668/hbnxb.2014.06.023

摘要

对苏云金芽孢杆菌Cry1Ab野生型基因的编码区序列进行改造,以获得密码子优化的抗虫基因,构建原核表达载体后,将重组载体转入大肠杆菌进行诱导表达并对诱导蛋白进行抗虫试验。首先根据植物密码子的偏好性及使用频率,优化、改造并人工合成了Cry1Ab基因,序列分析表明：改造后的Cry1Ab基因全长1848 bp,与原始序列同源性为66%,G+C含量由原来的37.34%提高到63.04%。将改造后的Cry1Ab基因与原核表达载体pET28b(+)连接,转化大肠杆菌BL21(DE3),阳性菌液进行诱导表达后,SDS-PAGE分析结果显示： Cry1Ab蛋白在BL21(DE3)细胞中得到高效表达,分子量为70 kDa。喂虫试验结果表明：诱导表达的蛋白对玉米螟具有很强的毒性,幼虫死亡率达到93．33%,而且,存活的玉米螟生长发育也受到明显抑制。该抗虫基因可以作为培育转基因抗虫作物的候选基因。