猪衣原体实时荧光定量 PCR 检测方法的建立及应用

• 作者: 刘力 李应国 李贤良 杨俊 王国民 王昱 聂福平 肖进文 袁曾壮
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 猪衣原体 实时荧光定量 PCR TaqMan-MGB
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 21-25
• 页数: 5页
• 分类号: S852.67
• 字数: 3677字
• 语种: 中文

摘要

为了建立猪衣原体（Chlamydia suis ）实时荧光定量 PCR（real-time PCR）检测方法，根据猪衣原体（C．cuis ）的 MOMP 基因，选取高度特异保守的区域，设计实时荧光定量 PCR 引物和探针，并构建了重组质粒。结果显示，该方法建立的标准曲线方程为：Y＝-3．2147x＋41．218，线性相关系数为0．9991，扩增效率为104．6％，最低检测量为1．7×102 copies ！μL。该检测方法特异性较好，与鹦鹉热亲衣原体、流产亲衣原体、沙眼衣原体、肺炎嗜衣原体、牛羊亲衣原体、鼠衣原体无交叉反应。批内和批间重复试验的变异系数在0．458％～1．174％范围内，具有较好的重复性；与普通 PCR 方法相比较，该方法具有较高的检出率。建立对猪衣原体的监测和流行病学调查都具有非常重要的意义。