谷子十里香抗锈抑制消减杂交文库构建及初步分析

• 作者: 全建章 刘磊 李志勇 王楠 白辉 董志平 董立 贾丽霞
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 抑制消减杂交 谷锈 谷子 表达序列标签
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 页码范围: 126-130
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 3961字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7668/hbnxb.2014.06.022

摘要

为了研究十里香抗锈分子机理及其调控机制。以谷子抗锈十里香接种12,24,48,72,96 h叶片为材料,利用抑制差减杂交技术,构建了谷锈菌诱导的SSH文库,筛选十里香接种与未接种锈菌差异表达的基因片段,通过Gen-Bank进行同源比对,对差异表达基因进行功能注释,并利用荧光定量PCR技术对部分差异表达片段进行表达分析。随机挑取差减文库中阳性克隆测序,共获得368个EST序列,插入片段大小为200~750 bp,通过网上GenBank非冗余数据库比对分析,发现其中32个EST与抗病相关。对与抗病相关的EST分析,推测WRKY转录因子、MAPK信号途径、钙信号途径、谷胱甘肽-S-转移酶、细胞色素P450、病程相关蛋白等可能参与了十里香与谷锈菌非亲和互作。进一步利用荧光定量PCR技术对SSH文库中4个基因做了表达分析,结果表明这些基因均受锈菌诱导表达。通过构建十里香受锈菌诱导的SSH文库,初步明确了十里香参与抗锈相关的基因,为下步谷子抗锈分子育种奠定基础。