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摘要:
目的:异源表达、纯化特异性降解高甲酯化果胶的碱性果胶酯裂解酶,研究其酶学性质.方法:采用PCR方法从枯草芽孢杆菌7-3-3中扩增到编码碱性果胶酯裂解酶的结构基因pelB,将去信号肽基因序列连接甲醇诱导型质粒pPIC9K,得到重组质粒pPIC9K-pelB,并转入毕赤酵母GS115进行表达,对该表达产物进行酶学性质分析.结果:纯化得到PelB及其糖基化蛋白,糖基化不影响PelB的酶活力.该酶可降解甲酯化程度为85%的果胶,比酶活达2 746 U/mg.在最适反应温度60℃,最适反应pH 9.0,45~65 ℃和pH 8.5~9.5范围具较高的酶活力.在40℃以下,pH 7.0~10.6的碱性范围,酶具有较高的稳定性.结论:PelB蛋白对高度甲酯化的果胶底物具有高解聚能力,在碱性条件下稳定,提示其具有良好的应用价值.
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文献信息
篇名 碱性果胶酯裂解酶的异源表达与性质研究
来源期刊 中国食品学报 学科
关键词 碱性果胶酯裂解酶 甲酯化底物 异源表达 酶学性质
年,卷(期) 2014,(11) 所属期刊栏目 研究报告
研究方向 页码范围 34-41
页数 分类号
字数 语种 中文
DOI
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 李雪芝 山东大学微生物技术国家重点实验室 32 322 11.0 16.0
2 赵建 山东大学微生物技术国家重点实验室 73 706 17.0 22.0
3 邹谋勇 山东大学微生物技术国家重点实验室 1 1 1.0 1.0
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甲酯化底物
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中国食品学报
月刊
1009-7848
11-4528/TS
16开
北京市海淀区阜成路北3街6号轻苑大厦3层
2001
chi
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