猪流行性腹泻病毒变异株N基因的克隆及原核表达

• 作者: 何孔旺 俞正玉 倪艳秀 姜平 孙冰 李彬 郭容利
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 猪流行性腹泻病病毒 N基因 序列分析 蛋白表达
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 兽医科技
• 页码范围: 72-76
• 页数: 5页
• 分类号: S855.3
• 字数: 4516字
• 语种: 中文

摘要

猪流行性腹泻病(Porcine epidemic diarrhea,PED)是我国猪群近两年的多发疾病.本试验于2012年在安徽分离到一株猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)AH2012.为研究该变异株N基因的特性,采用RT-PCR方法获得了其N基因片段,经测序后与其他代表性的PEDV基因序列进行同源性比较和遗传进化分析,发现该毒株与近年来在我国流行的几株PEDV变异株同源性在99.3～99.5％之间,进化分析显示该毒株属于目前流行的PEDV变异株.将其克隆到表达载体pET28a(+)中,构建了重组质粒pET28a-N,经测序鉴定正确后,转化至感受态细胞BL21 (DE3)中,并进行IPTG诱导表达.结果表明,重组菌可表达分子量为65 ku的融合蛋白,蛋白表达量较高,蛋白免疫印迹结果显示,表达的N蛋白能与PEDV阳性血清发生特异性的免疫反应,表明原核表达的N蛋白具有良好的反应原性.该研究可为猪流行性腹泻病的流行病学调查、诊断与防控方法的建立奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何孔旺	江苏省农业科学院兽医研究所	101	1368	22.0	33.0
2	姜平	南京农业大学动物医学院	186	1921	25.0	35.0
3	倪艳秀	江苏省农业科学院兽医研究所	30	581	12.0	24.0
4	李彬	江苏省农业科学院兽医研究所	30	136	7.0	10.0
5	郭容利	江苏省农业科学院兽医研究所	6	40	4.0	6.0
6	孙冰	南京农业大学动物医学院	2	5	1.0	2.0
7	俞正玉	江苏省农业科学院兽医研究所	16	93	6.0	8.0