猪传染性胃肠炎病毒S基因不同编码区的表达和反应原性鉴定

• 作者: 刘爵 周宏专 张晓东 徐福洲 杨兵 满坤 王金洛 罗绪刚 苏霞 覃湘婕
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪传染性胃肠炎病毒 S基因 原核表达 反应原性
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 页码范围: 63-67
• 页数: 5页
• 分类号: Q786|S828
• 字数: 3250字
• 语种: 中文

摘要

通过原核表达系统表达猪传染性胃肠炎病毒( TGEV) S基因不同编码区,以鉴定不同编码区表达产物与TGEV抗体的结合能力。在对TGEV S蛋白抗原位点分析的基础上,针对S蛋白N端的4个抗原位点C、B、D和A,设计引物分别扩增含C、B位点的TCB片段(411 bp)、含D位点的TD片段(441 bp)和含A位点的TA片段(456 bp),经克隆测序后分别插入原核表达载体pET-32a中进行表达,SDS-PAGE电泳显示各片段均高效表达,表达的TCB片段、TD片段和TA片段融合蛋白大小分别为34.6,35.1,36.1 kDa。 Western Blot结果表明,表达蛋白与TGEV感染猪阳性血清和His标签抗体均产生阳性反应。结果显示,3个S基因编码片段均具有与TGEV抗体结合的能力,为进一步鉴定不同编码区的免疫原性及抗原保护能力奠定了基础。