猪瘟病毒酵母双杂交 pGBK T7-NS3诱饵载体的构建与鉴定

• 作者: 刘湘涛 吴锦艳 宋江伟 尚佑军 田宏 陈妍
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 猪瘟病毒 NS3蛋白 酵母双杂交系统 诱饵载体
• 年，卷（期）: 2014,（8）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 40-43
• 页数: 4页
• 分类号: S852.651|Q782
• 字数: 3587字
• 语种: 中文

摘要

利用 RT-PCR技术扩增获得猪瘟病毒NS3基因片段，将其克隆至酵母双杂交系统诱饵载体pGBKT7中，经酶切，测序验证其正确插入后，将重组诱饵质粒转化酵母菌Y2H Gold ，检测其在酵母中毒性和自我激活作用，并利用Western blot分析诱饵载体在酵母中的转化情况。结果表明，pGBKT7-NS3诱饵载体在Y2H Gold酵母细胞中可以表达，此载体在酵母细胞Y2H Gold中无毒性和自我激活能力，研究结果为使用酵母双杂交技术筛选相互作用蛋白奠定了基础。