急性缺氧肺动脉平滑肌细胞线粒体活性氧变化的观察

• 作者: 吴昌归 张丽萍 张建银 杨朝 耑冰 葛利军 赵霞
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 活性氧 缺氧 线粒体 肺动脉平滑肌细胞 缺氧肺血管收缩
• 年，卷（期）: 2014,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 2009-2014
• 页数: 6页
• 分类号: R364.4
• 字数: 4697字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2014.11.015

摘要

目的:观察急性缺氧时大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)线粒体活性氧(ROS)的变化.方法:分离并培养大鼠PASMCs,常氧(35℃、5％ CO2、21％ O2、74％ N2)和急性缺氧(35℃、5％ CO2、1％ O2、94％ N2)条件下,利用分子探针chloromethyl dichlorodihydrofluorescein diacetate (CM-H2 DCF/DA)和RedoxSensor Red CC-1通过激光共聚焦显微镜来检测细胞内ROS的生成量;直接分离线粒体,用线粒体电子传递链(ETC)复合物抑制剂通过荧光分光光度计检测线粒体ROS及其生成的具体位点.结果:急性缺氧细胞内ROS生成明显增加,其中缺氧组H2 O2较常氧组增加3.35倍(P＜0.01),而H2 O2及O2-较常氧组增加1.61倍(P＜0.01).与缺氧组比,用线粒体ETC复合物Ⅰ抑制剂MPP、复合物Ⅱ抑制剂NPA和TTFA及复合物Ⅲ前泛半醌位点抑制剂myxothiazol都能显著降低缺氧时PASMCs胞内ROS的生成量(分别降低60％、73％、75％和61％,P＜0.01);而复合物Ⅲ后泛半醌位点抑制剂antimycin A及复合物Ⅳ抑制剂NaN3对ROS的生成无明显影响(升高13％和9.1％,P＞0.05).直接检测线粒体ROS与测定细胞内ROS结果一致.结论:急性缺氧PASMCs线粒体ROS(主要是H2 O2)的生成量明显增加;其生成位点主要是线粒体ETC复合物Ⅰ、Ⅱ及Ⅲ前泛半醌位点,而与复合物Ⅲ后泛半醌位点和ⅣV位点无明显关系.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴昌归	第四军医大学西京医院呼吸内科	128	1273	17.0	30.0
2	葛利军	宁夏人民医院心血管内科	21	85	6.0	8.0
3	杨朝	宁夏人民医院总院呼吸内科	20	89	6.0	8.0
4	张丽萍	宁夏人民医院总院呼吸内科	10	41	4.0	6.0
5	耑冰	宁夏人民医院总院呼吸内科	9	49	4.0	7.0
6	张建银	宁夏人民医院总院呼吸内科	2	11	2.0	2.0
7	赵霞	宁夏人民医院总院呼吸内科	5	22	2.0	4.0