猪流行性腹泻病毒M和S蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备

• 作者: 李玉峰 范宝超 郑芳园 陈攀
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 猪流行性腹泻病毒 M蛋白 S蛋白 原核表达 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 35-40
• 页数: 6页
• 分类号: S852.65
• 字数: 4206字
• 语种: 中文

摘要

采用PCR方法对猪流行性腹泻病毒(PEDV)M蛋白和S蛋白基因的亲水区进行扩增,扩增片段(命名为Ma和Sa)分别克隆至原核表达载体pET-32a(+)和pGEX-6p-1中,获得的重组质粒pET-32a-Ma和pGEX-6p-1-Sa转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE及Westernblot鉴定.表达产物经SDS-PAGE后切胶免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体,间接ELISA方法检测小鼠免疫后血清效价,Westemblot和间接免疫荧光方法检测抗体的特异性.结果表明目标蛋白获得了正确表达,且制备的多克隆抗体具有较高的敏感性和特异性.PEDV Ma和Sa蛋白的表达及多克隆抗体的制备将为进一步构建PEDV的病毒样颗粒(VLP)抗原和建立血清学检测方法奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李玉峰	南京农业大学农业部细菌学重点开放实验室	105	845	16.0	23.0
2	陈攀	南京农业大学农业部细菌学重点开放实验室	5	11	3.0	3.0
3	郑芳园	南京农业大学农业部细菌学重点开放实验室	4	11	3.0	3.0
4	范宝超	南京农业大学农业部细菌学重点开放实验室	3	5	1.0	2.0