不同方法诱导兔脂肪干细胞向软骨细胞分化的对比研究

• 作者: 伍耀宏 刘子颐 夏群 张杨 徐宝山 李秀兰 杨强 许海委 马信龙
• 来源期刊: 中华创伤杂志
• 关键词: 干细胞 软骨细胞 细胞诱导
• 年，卷（期）: 2014,（12）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1219-1224
• 页数: 6页
• 字数: 4247字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-8050.2014.12.016

摘要

目的 分别用细胞共培法和诱导液培养法诱导脂肪干细胞(adipose-derived stemcells,ADSCs)向软骨细胞分化,比较两种方法的诱导效果.方法 分离培养新西兰大白兔ADSCs和软骨细胞,分别培养至第2代用于实验.根据实验目的将实验分为三组:(1)对照组:将ADSCs接种于6孔板,普通高糖培养液培养;(2)细胞共培组:将软骨细胞和ADSCs分别接种于Transwell 6孔板的上层和下层,普通高糖培养液共同培养;(3)诱导液培养组:将ADSCs接种于6孔板,用软骨诱导液进行培养.倒置显微镜观察各组ADSCs的形态变化,14 d后行甲苯胺蓝染色、Ⅱ型胶原免疫组化,实时荧光定量PCR测定软骨细胞相关基因(蛋白聚糖、Ⅱ型胶原、SOX9)的表达情况.结果 细胞共培组和诱导液培养组ADSCs逐渐变为软骨样细胞形态,甲苯胺蓝、Ⅱ型胶原免疫组化均为阳性,其中诱导液培养组染色更深,对照组为阴性.荧光定量PCR结果显示Ⅱ型胶原、蛋白聚糖、SOX9的基因转录水平细胞共培组(1.427±0.066,2.128±0.076,1.082±0.081)和诱导液培养组(3.438±0.108,4.297±0.147,2.929±0.090)明显高于对照组(0.040±0.021,0.128±0.038,0.098±0.022) (P ＜0.05),且诱导液培养组高于细胞共培组(P＜0.05).结论 细胞共培法和诱导液培养法均可诱导ADSCs向软骨细胞定向分化,诱导液培养法诱导效果更好.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马信龙	天津医院脊柱外科	79	786	16.0	23.0
2	夏群	天津医院脊柱外科	78	672	15.0	20.0
3	李秀兰	天津医院骨科研究所细胞工程室	22	107	6.0	9.0
4	张杨	天津医院骨科研究所细胞工程室	18	66	4.0	7.0
5	徐宝山	天津医院脊柱外科	50	706	13.0	25.0
6	杨强	天津医院脊柱外科	22	150	8.0	11.0
7	许海委	天津医院脊柱外科	4	18	3.0	4.0
9	刘子颐	天津市第一中心医院医保科	2	1	1.0	1.0
12	伍耀宏	天津医院脊柱外科	5	14	3.0	3.0