双胞胎儿童牙菌斑宏基因组文库构建

• 作者: 李宇红 杜民权 相艳 谢灵芝 陆剑 陈泳杏
• 来源期刊: 口腔医学研究
• 学科: 医学
• 关键词: 牙菌斑 双胞胎儿童 宏基因组文库
• 年，卷（期）: 2014,（9）
• 所属期刊栏目: 临床研究论著
• 页码范围: 861-864
• 页数: 4页
• 分类号: R780.1
• 语种: 中文

摘要

目的:摸索构建口腔牙菌斑宏基因组文库的条件,为从口腔牙菌斑基因组中筛选耐酸基因奠定基础.方法:采用改进的SDS方法提取牙菌斑总DNA,用BamHI限制性内切酶部分酶切基因组DNA,以质粒pUC18为载体,转入大肠杆菌DH5α中.结果:最终构建了1对双胞胎儿童的两个宏基因组文库,文库白斑率达到90％,两个文库的克隆子均在1000个左右,文库质量检测重组率达到85.5％,插入片段大小集中在1.5～10 kb之间.结论:从文库的白斑率、重组率和插入片段大小可以看出文库的质量较好,这为后续从文库中筛选新的耐酸基因奠定了良好的基础.