Notch1（NICD）过表达真核载体构建及对大鼠BMSCs增殖分化的影响

• 作者: 付海燕 包翠芬 李东宁 杜红阳 秦书俭
• 来源期刊: 天津医药
• 关键词: 细胞增殖 细胞分化 转染 神经胶质原纤维酸性蛋白质 磷酸丙酮酸水合酶 Notch信号通路 骨髓间充质干细胞 诱导 Notch1(NICD)
• 年，卷（期）: 2014,（9）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 883-888
• 页数: 6页
• 分类号: R349.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-9896.2014.09.009

摘要

目的：探讨过表达Notch1(NICD)基因对大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）增殖分化的影响。方法构建Notch1(NICD)过表达真核载体，实验分正常对照组（CON组，不做转染）、阳性对照组（空载体组，将质粒pEGFP-N1转染BMSCs）和转染组（将重组质粒pEGFP-N1-NICD转染BMSCs）。转染48 h后观察细胞一般状态，Real-time PCR和Western blotting检测神经元特异性烯醇化酶（NSE）、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）和Notch1基因和蛋白表达，流式检测转染后细胞凋亡、细胞周期，MTT检测细胞增殖情况。结果重组质粒pEGFP-N1-NICD编码序列与设计完全一致。转染组和空载体组BMSCs均可表达绿色荧光。转染组GFAP、Notch1的基因和蛋白表达均高于CON组和空载体组（均P＜0.05），空载体组与CON组差异无统计学意义；各组间NSE的基因和蛋白表达差异无统计学意义。转染组存活细胞比率低于CON组和空载体组，早期细胞凋亡比率、晚期细胞凋亡比率均高于CON组和空载体组；空载体组晚期细胞凋亡比率高于CON组。转染组细胞处于G1/G0期的比例高于CON组和空载体组，处于S期和G2/M期的比例低于CON组和空载体组（均P＜0.05）。除转染1 d时各组MTT A490值差异无统计学意义外，其余时点转染组MTT A490值均低于CON组和空载体组（均P＜0.05）。结论高表达Notch1(NICD)基因可能在一定程度上诱导BMSCs凋亡、抑制其增殖，且表现诱导向神经胶质样细胞分化。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	秦书俭	辽宁医学院解剖学教研室	98	432	10.0	14.0
2	杜红阳	辽宁医学院附属第一医院皮肤科	20	131	7.0	11.0
3	包翠芬	辽宁医学院解剖学教研室	74	402	11.0	15.0
4	付海燕	辽宁医学院附属第一医院重症医学科	6	50	4.0	6.0
5	李东宁	辽宁医学院附属第一医院皮肤科	20	90	5.0	9.0