微球固定化蜗牛酶转化人参皂苷Rb1制备人参稀有皂苷Compound K研究

• 作者: 于兆慧 刘其媛 崔莉 张振海 贾晓斌 金鑫
• 来源期刊: 中草药
• 学科: 医学
• 关键词: 微球 固定化蜗牛酶 人参皂苷Rb1 人参稀有皂苷Compound K 交联-包埋法 正交试验
• 年，卷（期）: 2014,（21）
• 所属期刊栏目: 药剂与工艺
• 页码范围: 3092-3097
• 分类号: R284.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2014.21.011

摘要

目的 制备微球固定化蜗牛酶,并优选出微球固定化蜗牛酶转化人参皂苷Rb1 (Rb1)制备人参稀有皂苷CompoundK (CK)的最佳制备工艺.方法 采用交联-包埋法制备微球固定化蜗牛酶,以酶活力回收率为考察指标,通过正交试验优选出最佳制备工艺;考察了最适反应温度、最适反应pH值、热稳定性、pH稳定性和储存稳定性等酶学性质,并通过单因素考察转化温度、底物浓度、转化时间和固定化蜗牛酶使用次数对转化率的影响,优化制备工艺.结果 固定化蜗牛酶的最佳制备工艺:海藻酸钠质量浓度2％,CaC12质量浓度2％,SiO2与蜗牛酶质量比1∶1,在此条件下固定化蜗牛酶的酶活回收率为81.94％;固定化蜗牛酶与游离蜗牛酶在热稳定性与pH值稳定性方面显示出不同的性质,其中固定化蜗牛酶的最适反应温度为60℃,最适反应pH值为5.0.固定化蜗牛酶在15℃环境下保存30 d后,酶活回收率为55.17％.固定化蜗牛酶转化Rb1制备人参稀有皂苷CK的转化条件:转化温度为55℃,底物质量浓度为1.0 mg/mL,转化时间为36 h,转化次数为5次,平均转化率为36.79％.结论 蜗牛酶的固定化增强了其稳定性和使用寿命,且人参稀有皂苷CK的转化率提高,工艺简单,适合工业化生产.