持续Wnt信号通路激活促进胚胎干细胞源造血干细胞的增殖

• 作者: 张韬 林芳 纪斌峰 金静君 陈泳
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 干细胞 胚胎干细胞 造血干细胞 Wnt3a Wnt/β-catenin信号通路 福建省自然科学基金
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 研究与报告 -- 胚胎干细胞
• 页码范围: 880-887
• 页数: 8页
• 分类号: R394.2
• 字数: 7600字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2014.06.010

摘要

背景：如何提高胚胎干细胞诱导效率、促进胚胎干细胞源造血干细胞体外增殖成为目前急需解决的课题。<br>　　目的：以外源性Wnt3a作为诱导剂，激活培养中的小鼠胚胎干细胞Wnt/β-catenin信号通路，观察该通路的激活是否促进胚胎干细胞向造血祖细胞的定向分化。<br>　　方法：用外源性wnt3a(100μg/L)持续作用ES-E14TG2a小鼠胚胎干细胞21 d，通过细胞免疫荧光及蛋白免疫印迹检测细胞内β-catenin蛋白含量，QRT-PCR检测Wnt下游靶标基因的表达量来确定经典Wnt/β-catenin信号通路是否被激活，然后采用单层贴壁培养法诱导其向造血干细胞分化，流式细胞仪检测造血发育相关表面标志CD34+/Sca-1+，同时以QRT-PCR法检测造血相关基因的表达情况。<br>　　结果与结论：ES-E14TG2a小鼠胚胎干细胞经wnt3a(100μg/L)连续培养21 d后发现β-catenin蛋白在细胞内积累；Wnt信号通路的下游靶标基因Pitx2、Frizzled、Sox17、Oct4的表达量均出现不同程度的增加，可见经典 Wnt/β-catenin 信号通路有被激活；单层贴壁培养法诱导其向造血干细胞分化的过程中检测到CD34+/Sca-1+细胞含量在14 d时占总细胞量高达20.2%，而对照组的仅占11.9%。造血相关基因骨形态发生蛋白4、FLK2及CD34的表达量均增加，而Smad5的表达则明显受到抑制。说明Wnt3a持续作用可激活Wnt/β-catenin信号通路，并促进ES-E14TG2a小鼠胚胎干细胞向造血干细胞的定向分化。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	纪斌峰	福州大学生物科学与工程学院	1	2	1.0	1.0