脂肪干细胞的三维球形培养

• 作者: 刘庆 戴应 杨艳 王婵 郭永龙 陈建苏
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 干细胞 脂肪干细胞 诱导分化 球形培养 活力 低黏附培养 hanging-drop培养 Eppendorf管培养 国家自然科学基金
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 研究与报告 -- 脂肪干细胞
• 页码范围: 872-879
• 页数: 8页
• 分类号: R394.2
• 字数: 7656字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2014.06.009

摘要

背景：大多哺乳类细胞在正常生理状态下多以三维结构存在，为还原细胞本身在体内的自然状态，很多研究者开始尝试在体外对细胞进行三维培养，球形培养是一种常见的三维培养模式。<br>　　目的：尝试用3种不同的方法在体外对人脂肪干细胞进行球形培养，并观察其生物学特征。<br>　　方法：对提取的脂肪来源细胞进行表面 Marker 流式检测以及成脂成骨诱导鉴定后，证实为脂肪干细胞。先后用低黏附培养法、hanging-drop培养法和Eppendorf管培养法3种方法在体外对脂肪干细胞进行球形培养，对3种方法形成球形的特点进行比较分析，并通过 Imagej 软件计算出3组多细胞球体的平均面积，利用Viability/Cytotoxicity Assay Kit for Animal Live&Dead Cel s试剂盒对3组多细胞球体进行活力检测。<br>　　结果与结论：①通过流式细胞术鉴定细胞表型标志物，其中CD29，CD44，CD59完全阳性，同时成脂成骨诱导也为阳性，证实提取的细胞为脂肪干细胞。3代以内脂肪干细胞多呈长梭形，并克隆状生长。②低黏附培养法、hanging-drop 培养法、Eppendorf 管培养法均可使脂肪干细胞聚集成球形生长，但所成多细胞球形有所差异。低黏附培养法所形成的细胞球形大小不一，不易控制；而hanging-drop培养法和Eppendorf管培养法均可使脂肪干细胞形成大小均一的球形，但在大小和形成时间上有所不同。③3种不同方法所形成的球形细胞均保持较好的细胞活力。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈建苏	暨南大学再生医学教育部重点实验室	62	385	12.0	16.0
5	戴应	暨南大学再生医学教育部重点实验室	4	10	3.0	3.0
6	刘庆	暨南大学医学院眼科研究所	10	41	3.0	6.0
7	杨艳	暨南大学医学院眼科研究所	6	35	3.0	5.0
8	郭永龙	暨南大学再生医学教育部重点实验室	6	15	3.0	3.0
9	王婵	暨南大学再生医学教育部重点实验室	5	11	2.0	3.0