脂质体介导RNA干扰质粒转染鸡成骨细胞条件的优化

• 作者: 侯加法 孟范勇 崔军 张杰 马会杰
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 成骨细胞 鸡 转染 RNA干扰 脂质体
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 20-22
• 页数: 3页
• 分类号: S852.2
• 字数: 2858字
• 语种: 中文

摘要

本试验的目的是优化转染条件,提高在阳离子脂质体LipofectamineTM 2000介导下鸡TRPV6基因RNA干扰(RNAi)质粒转染入成骨细胞的效率.将携带绿色荧光蛋白基因的真核表达载体pSIREN-retroQ-shTRPV6在LipofectamineTM 2000介导下转染至鸡成骨缅胞,对转染前缅胞融合度、质粒质量与脂质体体积比及转染时间进行优化,在荧光倒置显微镜下观察并计算转染效率,MTT法检测在不同质粒质量与脂质体体积比条件下成骨细胞的活性.结果表明,在转染前细胞融合达到90％以上,质粒DNA与脂质体比例为1:2.5时转染效率最高,并且在转染后48 h转染效果最好,对细胞的毒性作用较小.本试验优化了脂质体介导转染鸡成骨细胞的条件,提高了转染效率,为用RNA干扰技术研究鸡TRPV6基因功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	侯加法	南京农业大学动物医学院	144	1082	17.0	25.0
2	张杰	南京农业大学动物医学院	20	654	12.0	20.0
3	崔军	南京农业大学动物医学院	4	5	2.0	2.0
4	孟范勇	南京农业大学动物医学院	3	2	1.0	1.0
5	马会杰	南京农业大学动物医学院	1	2	1.0	1.0