麻栗坡兜兰ISSR引物筛选及反应体系的优化

• 作者: 高丽霞
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 麻栗坡兜兰 ISSR-PCR 体系优化
• 年，卷（期）: 2014,（20）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 6553-6555
• 页数: 3页
• 分类号: S188
• 字数: 3045字
• 语种: 中文

摘要

[目的]对麻栗坡兜兰ISSR引物进行筛选,并建立一个稳定性高、重现性好、适合麻栗坡兜兰ISSR反应体系.[方法]以麻栗坡兜兰DNA为模板,分别对Mg2+、dNTP、引物、Taq DNA聚合酶、DNA等PCR反应成分进行优化,并用优化的体系对25条兰科中报道的ISSR引物进行筛选.[结果]确立了麻栗坡兜兰最适ISSR-PCR反应体系:在25μl反应体系中,Mg2+2 mmol/L、引物0.4 mmoL/L、dNTP 0.20 mmol/L、DNA 1.5μl、Taq酶1.4U.利用该体系,共筛选得到10条ISSR引物用于麻栗坡兜兰分析,并对21份麻栗坡兜兰材料进行扩增,获得了较好的扩增效果.[结论]该体系稳定可靠,为今后ISSR标记在兜兰属植物的种质鉴定、遗传多样性等方面的广泛应用奠定了重要基础.