结肠癌干细胞样细胞的体外培养、鉴定及n-3多不饱和脂肪酸对结肠癌干细胞样细胞的抗增殖作用

• 作者: 卢味 张冰 方仕 李鹤平 杨婷 石汉平 龙健婷
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 结肠肿瘤 肿瘤干细胞 无血清培养 n-3多不饱和脂肪酸 化学治疗
• 年，卷（期）: 2014,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 2135-2141
• 页数: 7页
• 分类号: R735.34
• 字数: 4502字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2014.12.004

摘要

目的：采取无血清培养法培养出SW620细胞球，并对细胞球细胞进行干细胞鉴定；在细胞水平研究n-3多不饱和脂肪酸（ n-3 PUFAs）对结肠癌干细胞样细胞的作用。方法：正常培养人结肠癌细胞株SW620并使其逐步适应无血清培养条件，经无血清培养1周后收集SW620细胞球。用免疫荧光法检测胚胎干细胞标志物SSEA-1和TRA-1-81；采用real-time PCR的方法检测干细胞相关基因Sox-2和Oct-4的表达情况；对比SW620贴壁细胞和干细胞样细胞（ CSCLC）在软琼脂上的克隆形成能力；采用裸鼠移植瘤模型比较2种细胞的成瘤能力；用MTS法对比2种细胞在递增浓度的5-氟尿嘧啶（5-FU）或mitomycin C处理下的生长抑制情况；用MTS法、Annexin V／PI染色和台盼蓝染色分别观察递增浓度二十二碳六烯酸（ DHA）和二十碳五烯酸（ EPA）作用于SW620 CSCLC后细胞生长抑制情况、凋亡情况和死亡情况；MTS法检测5-FU或mitomycin C联合n-3 PUFAs对结肠癌CSCLC增殖的影响。结果：无血清培养法成功从SW620中培养出细胞球。细胞球细胞高表达SSEA-1和TRA-1-81并一过性表达Sox-2和Oct-4基因；对5-FU及mitomycin C相对抵抗；在软琼脂上克隆形成率及在裸鼠皮下的成瘤率均显著高于贴壁细胞，表明这些细胞具有干细胞特性，即为来自于SW620的CSCLC。 DHA和（或） EPA作用于SW620 CSCLC能抑制细胞生长、诱导细胞凋亡，并能增强5-FU及mitomycin C对其抑制作用。结论：无血清培养法能够从SW620细胞中培养出具有干细胞特性的细胞，它们具有高克隆形成能力及高致瘤性，对化疗药物相对抗拒；DHA和EPA能够诱导SW620来源CSCLC发生凋亡并增强化疗药物的抗肿瘤活性。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李鹤平	中山大学附属第一医院肿瘤科	61	201	8.0	10.0
2	石汉平	中山大学附属第一医院普通外科	92	754	14.0	24.0
3	卢味	中山大学附属第一医院临床营养科	12	154	6.0	12.0
4	张冰	中山大学附属第一医院核医学科	58	269	10.0	14.0
5	龙健婷	中山大学附属第一医院肿瘤科	6	57	4.0	6.0
6	方仕	中山大学附属第一医院临床营养科	17	213	7.0	14.0
7	杨婷	中山市人民医院重症治疗科	4	13	2.0	3.0