RT-LAMP检测鸡传染性支气管炎病毒方法的建立及应用

• 作者: 刘嫒 孔维祥 尹强军 杨钰 汪德生 苏刚 邓诗 鲜思美
• 来源期刊: 中国兽医杂志
• 关键词: 鸡传染性支气管炎病毒 逆转录环介导等温扩增技术 快速检测
• 年，卷（期）: 2014,（8）
• 所属期刊栏目: 实验观察
• 页码范围: 26-29
• 页数: 4页
• 分类号: S852.65
• 语种: 中文

摘要

以鸡传染性支气管炎病毒(Infectious Bronchitis Virus,IBV)的N基因保守区域设计4条引物,通过优化反应条件,建立了检测IBV的逆转录环介导等温扩增技术(RT-LAMP),并进行了特异性试验、敏感性试验及临床样本检测.结果显示,建立的RT-LAMP方法对IBV参考株扩增产物的电泳呈特征性梯状条带,而新城疫病毒(NDV)、禽流感病毒(AIV)、马立克病病毒(MDV)、传染性囊病病毒(IBDV)等的扩增产物电泳后均无扩增条带.该方法最低能梭出0.19 pg的IBV cDNA模板,敏感性比常规RT-PCR方法高1 000倍.用该方法检测了6份临床疑似IB临床病料,检出率为100％(6/6),与常规RT-PCR的符合率为100％.60 min反应结束后,离心可以看到白色沉淀物,简单直观,适用于基层实验室快速准确诊断.