北京棒杆菌天冬氨酸激酶G377定点突变及酶学性质表征

• 作者: 朱运明 王晓飞 王隆洋 詹冬玲 闵伟红
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 北京棒杆菌 天冬氨酸激酶 定点突变 酶学性质
• 年，卷（期）: 2014,（9）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 192-197
• 页数: 6页
• 分类号: Q814.9
• 字数: 4879字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-201409038

摘要

采用饱和定点突变和高通量筛选技术,对北京棒杆菌天冬氨酸激酶(aspartate kinase,AK) AK Gly377位点进行突变,并筛选获得高活力突变体G377F,分离纯化后对G377F AK酶学性质进行表征.结果表明:突变体AK最适pH值为9.0,较突变前野生型(wide type,WT)最适pH值为8.5有所提高;最适反应温度与WT一致,均为25℃;半衰期由WT的2.6h提高到5.3h;pH耐受性在5h内保持其活力50％以上,与WT3h内酶活力保持能力相同.G377F对金属离子和有机溶剂均表现出良好的抗性.其中,Lys的抑制作用在一定程度上被解除,当Lys和Met同时存在时对AK具有明显的激活作用.动力学研究显示:G377F AK Vmax较WT提高9.3倍;n值为1.0明显低于WT的2.7,说明AK正协同性降低,趋向于米氏酶.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	闵伟红	小麦和玉米深加工国家工程实验室吉林农业大学食品科学与工程学院	8	19	2.0	4.0
2	朱运明	小麦和玉米深加工国家工程实验室吉林农业大学食品科学与工程学院	2	11	1.0	2.0
3	王晓飞	小麦和玉米深加工国家工程实验室吉林农业大学食品科学与工程学院	1	11	1.0	1.0
4	詹冬玲	小麦和玉米深加工国家工程实验室吉林农业大学食品科学与工程学院	1	11	1.0	1.0
5	王隆洋	小麦和玉米深加工国家工程实验室吉林农业大学食品科学与工程学院	1	11	1.0	1.0