牛支原体间接ELISA检测方法的建立

• 作者: 剡根强 王超丽 王静梅 金云云 马玉英
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 间接ELISA 牛支原体 抗体
• 年，卷（期）: 2014,（2）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 10-14
• 页数: 5页
• 分类号: S852.62
• 字数: 3779字
• 语种: 中文

摘要

以牛支原体(Mycoplasma bovis)全菌蛋白经超声波裂解后的裂解物作为包被用抗原,建立检测牛支原体血清抗体的间接ELISA方法.通过棋盘滴定法确定抗原最适包被浓度、待检血清最佳稀释度,同时对抗原的包被方式、封闭剂和封闭时间、酶标二抗最佳工作浓度、一抗和二抗最佳作用时间、血清稀释液、底物显色时间进行优化.用该方法测定10份阴性血清的OD450值计算出阴性临界值,并对牛布氏杆菌病、牛病毒性腹泻黏膜病抗血清进行检测.结果:抗原最适包被浓度为200 μg/mL,待检血清最佳稀释度为1∶100,阴性临界值为0.327.用该方法检测牛布氏杆菌病、牛病毒性腹泻黏膜病抗血清均无交叉反应,表明该间接ELISA具有很好的特异性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王静梅	石河子大学动物科技学院	75	426	11.0	16.0
2	剡根强	石河子大学动物科技学院	144	836	15.0	23.0
3	金云云	石河子大学动物科技学院	5	59	5.0	5.0
4	王超丽	石河子大学动物科技学院	7	25	3.0	4.0