弓形虫CDPK1-EF基因的克隆与原核表达

• 作者: 刘思嘉 徐前明 李培英
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 弓形虫 CDPK1-EF基因 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2014,（2）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 5-9
• 页数: 5页
• 分类号: S852.72
• 字数: 3823字
• 语种: 中文

摘要

CDPK是一类钙依赖蛋白激酶,其可参与调控寄生虫入侵,外出宿主细胞,配子的形成及在宿主体内移行等.采用RT-PCR技术,扩增弓形虫RH株目的基因钙依赖蛋白激酶EF模体(CDPK1-EF),然后将其克隆至表达载体pET-32a,以构建重组质粒ET-32a-CDPK1-EF,经IPTG诱导目的蛋白表达,并采用Ni-NTA亲和层析法纯化,最后经SDS-PAGE分析重组表达蛋白.结果,成功地克隆出弓形虫CDPK1-EF基因,序列比对表明,其与GenBank报道的相关序列同源性达100％.采用SDS-PAGE技术对诱导表达蛋白以及纯化产物检测发现37 ku目的蛋白出现,与预期结果相一致.本文在国内首次成功克隆和表达弓形虫RH株CDPK1-EF基因,这为研究该基因功能及分布特征等提供了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐前明	安徽农业大学动物科技学院	76	309	10.0	14.0
2	李培英	安徽农业大学动物科技学院	104	739	14.0	19.0
3	刘思嘉	安徽农业大学动物科技学院	3	2	1.0	1.0