骨形态发生蛋白2诱导慢性腱病大鼠肌腱干细胞体外成骨、成软骨分化

• 作者: 成心锟 林禹丞 王宸 芮云峰 马良彧
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 干细胞 诱导 慢性腱病 肌腱干细胞 成骨分化 成软骨分化 骨形态发生蛋白2 国家自然科学基金
• 年，卷（期）: 2014,（19）
• 所属期刊栏目: 技术与方法 -- 干细胞培养与分化
• 页码范围: 3075-3081
• 页数: 7页
• 分类号: R394.2
• 字数: 8271字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344

摘要

背景：目前临床对于慢性腱病缺乏有效的治疗手段，原因在于其发病机制至今尚未阐明。<br>　　目的：研究体外骨形态发生蛋白2对胶原酶诱导的大鼠慢性腱病模型髌腱来源肌腱干细胞的成骨、成软骨分化的作用。<br>　　方法：从大鼠慢性腱病模型的髌腱中分离培养出原代肌腱干细胞，传代培养至第3代细胞，行成骨、成脂、成软骨诱导分化鉴定其干细胞的特性。将肌腱干细胞(P3)单层培养至细胞融合，用重组人骨形态发生蛋白2干预。7 d后分别行茜素红染色，并行茜素红染色定量分析。将肌腱干细胞体外三维微球培养后分为2组，诱导组用重组人骨形态发生蛋白2干预，对照组不进行干预。21 d后三维微球行苏木精-伊红染色，阿利辛蓝染色以及Sox9和Ⅱ型胶原免疫组织化学染色。<br>　　结果与结论：慢性腱病大鼠来源原代肌腱干细胞体外培养呈克隆样集落生长，传代后细胞主要表现为多突的纺锤形和星形的扁平细胞，具有成纤维细胞样的特征。肌腱干细胞(P3)成脂诱导10 d，油红O染色阳性；成骨诱导7 d，茜素红染色阳性；成软骨诱导14 d，苏木精-伊红染色阳性可见软骨样细胞，Ⅱ型胶原免疫组化染色阳性。单层培养的肌腱干细胞用重组人骨形态发生蛋白2诱导7 d茜素红染色阳性，对照组为阴性，茜素红染色定量检测显示差异有显著性意义。重组人骨形态发生蛋白2诱导肌腱干细胞21 d，苏木精-伊红染色可见软骨样细胞形成、阿利辛蓝染色可见细胞内糖胺多糖沉积、Sox9和Ⅱ型胶原免疫组织化学染色均呈阳性。可见体外重组人骨形态发生蛋白2可以诱导慢性腱病来源的肌腱干细胞成骨、成软骨分化。这为进一步研究慢性腱病的发病机制提供了细胞生物学依据。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王宸	东南大学附属中大医院骨科	140	1003	16.0	22.0
2	成心锟	东南大学医学院	3	12	2.0	3.0
3	马良彧	东南大学医学院	5	12	2.0	2.0
4	芮云峰	东南大学附属中大医院骨科	21	85	6.0	8.0
5	林禹丞	东南大学附属中大医院骨科	8	30	3.0	5.0