诱导多能干细胞建系及体外造血祖细胞定向分化体系的建立

• 作者: 崔大祥 朱殷 李金辉 汪铮 沈洁 范志宏 邱云 阮静
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 干细胞 培养 诱导多能性干细胞 类胚体 造血祖细胞 体外分化
• 年，卷（期）: 2014,（19）
• 所属期刊栏目: 技术与方法 -- 干细胞培养与分化
• 页码范围: 3005-3011
• 页数: 7页
• 分类号: R394.2
• 字数: 8687字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344

摘要

背景：目前，大量文献报道了诱导多能性干细胞系的建立，但大规模体外诱导分化造血祖细胞的研究还缺乏深入的探讨。<br>　　目的：建立诱导多能性干细胞体外定向诱导形成造血祖细胞的方法。<br>　　方法：采用慢病毒感染的方法将含有Oct4、Sox2、Nanog和Lin28全能性基因的慢病毒颗粒转导人皮肤成纤维细胞，获得了诱导多能性干细胞；在诱导分化体系中添加了 Y-27632，克服干细胞扩增中的凋亡现象；运用OP9细胞产生的条件培养液建立诱导多能性干细胞体外定向分化形成造血祖细胞的分化体系。<br>　　结果与结论：①前3代细胞克隆传代时，诱导多能性干细胞发生凋亡的现象很多，很难大规模扩增培养。培养基中添加阻断 ROCK活化的抑制剂，能够明显抑制胚胎干细胞的凋亡。②诱导多能性干细胞在 OP9细胞条件培养液作用下，经过体外诱导分化，形成CD34+造血祖细胞。