猪伪狂犬病毒gE基因主要表位区的表达及gE-ELISA方法的建立

• 作者: 乃德合 周拉
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 伪狂犬病病毒 gE基因 原核表达
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 兽医科技
• 页码范围: 87-90
• 页数: 4页
• 分类号: S852.65
• 字数: 2736字
• 语种: 中文

摘要

根据GenBank中登录的猪伪狂犬病毒(PRV) gE基因序列,设计特异性表达引物,扩增gE富含B细胞表位的一段编码序列.扩增片段通过BamH Ⅰ和SalⅠ酶切位点插入表达载体pET-30a.序列测定表明,重组表达质粒所含的gE基因读码框正确.重组表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3) pLys,经IPTG诱导表达目的蛋白.表达产物经SDS-PAGE和Western blot检测表明,gE基因主要表位区成功地在大肠杆菌表达,表达产物约为28 ku的融合蛋白,能与PRV感染动物血清发生特异性反应,具有良好的反应原性.以纯化的gE蛋白为包被抗原,建立了ELISA检测方法.本试验为我国实施伪狂犬病的扑灭计划提供了必要的手段.