大鼠羊水间充质干细胞向Ⅱ型肺泡上皮细胞定向分化的体外实验

• 作者: 严建平 夏英捷 李亚清 许武林 陈淳 顾超
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 关键词: 间质干细胞 肺泡 上皮细胞 细胞分化 大鼠
• 年，卷（期）: 2014,（26）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 2050-2054
• 页数: 5页
• 字数: 3317字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2014.26.012

摘要

目的：观察体外诱导大鼠羊水间充质干细胞（ AF-MSCs ）向Ⅱ型肺泡上皮细胞的定向分化。方法选取10只清洁级妊娠SD大鼠，收集羊水标本，分离、培养AF-MSCs，以流式细胞术分析其表型标记、实时荧光定量聚合酶链反应（ qRT-PCR）检测Oct-4 mRNA表达（以大鼠胚胎干细胞作为阳性对照）；根据不同体外诱导培养方法，将AF-MSCs分为A（空白对照组）、B、C、D、E共5组，各组体外不同诱导方法处理后qRT-PCR检测肺表面活性蛋白（ SP） A、SPB、SPC、SPD和TTF1 mRNA表达水平，免疫荧光法检测SPA、SPC蛋白水平以及电镜观察嗜锇性板层小体。结果大鼠AF-MSCs在含20％胎牛血清、4μg/L碱性成纤维细胞生长因子的L-DMEM培养基中呈旋涡状生长，第3代AF-MSCs表型标记中 CD29、CD44、CD73、CD90、CD105和 CD166阳性表达率分别为（99.1±7.9）％、（99.2±7.4）％、（75.6±5.2）％、（98.9±8.1）％、（92.9±7.3）％和（89.3±6.7）％，而CD34和CD45表达阴性；Oct-4 mRNA相对表达量（0.690±0.059）显著低于大鼠胚胎干细胞阳性对照（1.000±0.002）（P＜0.01）；体外诱导分化后，A组SPA、SPB、SPC、SPD和TTF1 mRNA及SPA、SPC蛋白均为阴性表达，而B组SPA、SPB、SPC、SPD和TTF1 mRNA相对表达量分别为0.426±0.043、0.368±0.028、0.492±0.058、0.327±0.024和0.183±0.018，均显著高于其他各组（均P＜0.01），SPA、SPC蛋白绿色荧光呈强阳性表达；同时，在B组中观察到嗜锇性板层小体。结论 AF-MSCs在体外能通过特定的诱导定向分化为Ⅱ型肺泡上皮细胞。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	严建平	浙江省人民医院呼吸内科	36	242	9.0	13.0
2	许武林	浙江省人民医院呼吸内科	17	98	5.0	9.0
3	李亚清	浙江省人民医院呼吸内科	25	109	6.0	9.0
4	陈淳	浙江省人民医院呼吸内科	9	49	4.0	6.0
5	顾超	浙江中医药大学第二临床医学院	17	48	3.0	6.0
6	夏英捷		3	18	2.0	3.0