甜瓜叶片蛋白的提取和双向电泳体系的优化

• 作者: 宁雪飞 李冠 王贤磊 钟俐 闫伟丽
• 来源期刊: 中国农学通报
• 学科: 生物学
• 关键词: 甜瓜叶片 蛋白提取 双向电泳
• 年，卷（期）: 2014,（19）
• 所属期刊栏目: 园艺-研究报告
• 页码范围: 105-110
• 分类号: Q946.1
• 语种: 中文

摘要

为建立适合甜瓜(Cucumis melo L.)叶片蛋白质组分析的双向电泳体系(2-D),以甜瓜植物叶片为试验材料,比较了2种不同植物叶片蛋白的提取方法,并对双向电泳的2个重要的环节技术即聚焦参数和上样量进行了优化.结果表明:与Tirs-酚提取法相比,使用改良后的Mg/NP-40/PEG3350/TCA丙酮提取法提取叶片蛋白,经过SDS-PAGEF分析之后,所得的蛋白含量较高,Rubisco酶去除的较好,条带清晰.采用pH 3～10,18 cm的IPG胶条进行双向电泳时,适当增加低电压聚焦时间,得到了较为清晰的2-D图谱.蛋白上样量为800 μg时,得到的蛋白点数最多,低峰度蛋白较为清晰.研究建立了适用于甜瓜叶片蛋白分析的双向电泳体系,得到了蛋白点数目多且分辨率高的双向电泳图谱.为下一步在蛋白组学水平上分析与甜瓜抗病、产量、性状等相关蛋白提供了技术支持.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李冠	新疆大学生命科学与技术学院	125	1244	20.0	27.0
2	王贤磊	新疆大学生命科学与技术学院	35	306	9.0	16.0
3	钟俐	新疆大学生命科学与技术学院	17	68	5.0	8.0
4	宁雪飞	新疆大学生命科学与技术学院	17	66	5.0	7.0
5	闫伟丽	新疆大学生命科学与技术学院	2	13	2.0	2.0