BVDV 1型和2型焦磷酸测序检测方法的建立

• 作者: 任炜杰 刘春菊 刘海生 吕艳 吴延功 张永强 王志亮 王清华 赵永刚
• 来源期刊: 中国兽医杂志
• 关键词: BVDV 焦磷酸测序 分型
• 年，卷（期）: 2014,（7）
• 所属期刊栏目: 调查研究
• 页码范围: 14-17
• 页数: 4页
• 分类号: R96
• 语种: 中文

摘要

为了建立BVDV 1型和2型焦磷酸测序检测方法,用于BVDV的确诊和分型.根据GenBank中发表的BVDV 5'-UTR序列,设计通用扩增引物和分别针对BVDV 1型和2型的两条测序引物.以BVDV 1型BA株和BVDV 2型分离株为模板,用通用引物进行RT-PCR扩增,用测序引物对扩增产物进行焦磷酸测序,建立BVDV 1型和BVDV2型焦磷酸测序检测方法.结果显示,焦磷酸测序技术检测的序列为30个碱基以上,可用于BVDV的快速鉴定和分型.用该方法对奶牛场86份抗凝血样品进行检测.共检测出2份BVDV 1型,没有检测出BVDV2型.将检测为阳性的RT-PCR产物测序,测序结果与焦磷酸测序结果一致,符合率为100％.表明本研究建立的BVDV1型和2型焦磷酸测序检测方法,可用于BVDV的检测和分型,能一次性对待检样品进行确诊,是一种简便、快速的BVDV分型检测方法,对于BVDV的快速确诊具有重要意义.