构建及鉴定人生存素基因的慢病毒表达载体

• 作者: 张国庆 杨堃 胡有谷 赵亮 陈伯华 马学晓
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 组织构建 组织工程 生存素 慢病毒 髓核细胞 细胞凋亡 基因转染 国家自然科学基金
• 年，卷（期）: 2014,（11）
• 所属期刊栏目: 技术与方法 -- 组织构建细胞学实验
• 页码范围: 1755-1760
• 页数: 6页
• 分类号: R318
• 字数: 1262字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2014.11.019

摘要

背景：抑制椎间盘细胞的凋亡可以延缓椎间盘的退变，而生存素具有调节细胞增殖和抗凋亡功能。<br>　　目的：构建人生存素基因的慢病毒载体。方法：应用全基因合成技术合成人生存素基因(BIRC5)，通过 PCR扩增目的基因并对 PCR 结果进行电泳分析。将目的基因克隆到慢病毒表达质粒构建重组慢病毒质粒 Lenti-BIRC5。将重组的慢病毒质粒转化细菌感受态细胞，PCR鉴定阳性的克隆进行基因测序。将含有目的基因的慢病毒质粒转染293T细胞，应用Western blot技术对重组慢病毒载体 Flag-Survivin 融合蛋白的表达进行检测。<br>　　结果与结论：PCR鉴定及基因测序结果显示成功构建了含有人Survivin基因的慢病毒表达载体，Western blot检测结果显示目的基因在体外培养细胞中转染成功并且过表达。说明慢病毒表达载体Lenti-BIRC5构建成功，这为下一步研究Survivin在人髓核细胞中的抗凋亡作用提供了载体。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张国庆	青岛大学医学院附属医院脊柱外科	45	194	8.0	12.0
2	马学晓	青岛大学医学院附属医院脊柱外科	50	100	6.0	7.0
3	胡有谷	青岛大学医学院附属医院脊柱外科	120	1086	17.0	28.0
4	陈伯华	青岛大学医学院附属医院脊柱外科	111	468	10.0	18.0
5	杨堃	青岛大学医学院附属医院中心实验室	59	195	8.0	11.0
6	赵亮	青岛大学医学院附属医院脊柱外科	5	0	0.0	0.0