过表达大鼠TIPE2基因重组腺病毒载体的构建

• 作者: 余云生 周东明 张有斌 沈振亚
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 组织构建 组织工程 器官移植 重组腺病毒Adc68 TIPE2基因 基因表达 转染 T细胞
• 年，卷（期）: 2014,（11）
• 所属期刊栏目: 技术与方法 -- 组织构建细胞学实验
• 页码范围: 1743-1748
• 页数: 6页
• 分类号: R394.2
• 字数: 6187字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2014.11.017

摘要

背景：TIPE2抗炎蛋白，通过对T细胞受体(TCR)和T细胞TOLL样受体信号途径实行负向调节，从而对适应性免疫和固有免疫起到负性调控作用，有效地维持机体内环境的稳定。<br>　　目的：使用人工合成腺病毒载体构建能过表达大鼠TIPE2基因的重组腺病毒。<br>　　方法：利用RT-PCR的方法，从大鼠淋巴细胞中扩增出大鼠TIPE2基因，克隆到穿梭质粒pShuttle-clontech的表达框中，然后将包含TIPE2的完整表达框，进一步亚克隆到黑猩猩来源的腺病毒包装载体AdC68，转染HEK 293A细胞，包装出重组腺病毒。并以其感染HEK293A细胞，采用western blotting方法检测TIPE2基因的表达水平。<br>　　结果与结论：PCR扩增、酶切鉴定和测序结果表明，所获取的cDNA为TIPE2的蛋白编码基因，western blotting结果表明，重组腺病毒能可高效表达TIPE2基因。说明成功完成AdC68-TIPE2重组腺病毒的构建，该腺病毒载体，能稳定表达大鼠TIPE2基因。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	沈振亚	苏州大学附属第一医院心脏大血管外科	276	741	11.0	16.0
2	余云生	苏州大学附属第一医院心脏大血管外科	84	182	7.0	8.0
3	周东明	中国科学院上海巴斯德研究所	16	34	4.0	4.0
4	张有斌	苏州大学附属第一医院心脏大血管外科	4	4	1.0	2.0