猪去氧胆酸人工抗原的合成及鉴定

• 作者: 冯会宾 孔慧 孙晔 屈会化 张越 王庆国 赵妍 赵琰
• 来源期刊: 中草药
• 学科: 医学
• 关键词: 猪去氧胆酸 人工抗原 合成 混合酸酐法 薄层色谱 酶联免疫吸附测定
• 年，卷（期）: 2014,（23）
• 所属期刊栏目: 药剂与工艺
• 页码范围: 3387-3391
• 分类号: R284.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2014.23.006

摘要

目的 合成并鉴定猪去氧胆酸(hyodeoxycholic acid,HDCA)人工抗原,为进一步制备其特异性抗体,建立相应的免疫分析方法,并为其应用到药理药效的研究中奠定基础.方法 采用混合酸酐法合成HDCA人工抗原(HDCA-牛血清白蛋白),包被原(HDCA-鸡卵清白蛋白);应用硅胶薄层色谱法鉴定人工抗原、包被原合成是否成功;应用人工抗原与弗氏佐剂的乳化液背部皮下多点注射免疫BALB/c小鼠4次后,尾尖取血,通过酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)方法测定免疫小鼠抗血清的效价和特异性.结果 薄层色谱法检测结果表明,HDCA与牛血清白蛋白(BSA)偶联成功;小鼠抗血清效价大于1∶8 000,竞争抑制曲线表明,血清中的抗体可与HDCA产生特异性结合.抗血清和甘草酸、黄芩苷、栀子苷等与其常配伍应用的中药化合物均无交叉反应,但与胆酸交叉反应率为90％.结论 成功合成了HDCA-BSA,并可诱发小鼠产生相应特异性抗体.为进一步制备抗HDCA单克隆抗体及HDCA药理作用靶点的研究奠定了基础.