鲫鱼卵唾液酸糖蛋白化学结构分析及对前成骨细胞MC3T3-E1增殖分化的影响

• 作者: 夏光华 王静凤 薛长湖 詹麒平 贺敏
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 工学
• 关键词: 鲫鱼卵唾液酸糖蛋白 分离纯化 MC3T3-E1细胞 增殖 分化
• 年，卷（期）: 2014,（13）
• 所属期刊栏目: 营养卫生
• 页码范围: 203-207
• 页数: 5页
• 分类号: TS254.4
• 字数: 3577字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-201413039

摘要

目的:成熟的鲫鱼卵经提取、分离纯化得到唾液酸糖蛋白(sialyglycoproteins of Carassius auratus eggs,CA-SGP),分析其化学结构,及对前成骨细胞MC3T3-E1增殖分化的影响.方法:采用水提法从成熟鲫鱼卵中提取水溶性蛋白,经阴离子交换色谱、凝胶过滤色谱分离纯化鲫鱼卵水溶性蛋白得到CA-SGP,测定其基本组成,采用高效凝胶液相色谱和聚丙烯酰胺凝胶电泳测定其分子质量和纯度,PMP柱前衍生高效液相色谱法测定其单糖组成;采用噻唑蓝法测定MC3T3-E1细胞的增殖率,酶联免疫法测定Ⅰ型胶原蛋白(collagen type Ⅰ,COL Ⅰ)和骨钙素(osteocalcin,OCN)的分泌量及碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)的活性,茜素红染色法测定矿化结节的数量.结果:得到单一的组分CA-SGP,在高效凝胶过滤色谱色谱图上呈现单一的糖和蛋白的检测重叠峰,在凝胶电泳图上呈现单一弥散性条带,其蛋白质含量为14.33％,己糖含量为62.81％,N-乙酰神经氨酸(N-acetylneurainic acid,Neu5Ac)含量为19.72％.单糖组成测定结果显示:CA-SGP主要由甘露糖、葡萄糖胺、半乳糖胺组成,其物质的量比为7.61∶6.70∶ 1.00; MC3T3-E1细胞与CA-SGP共同孵育后,其增殖率显著增加,COLⅠ和OCN的分泌量分别增加了39.28％和83.06％,ALP活性提高了285.08％,矿化结节的数量增加了96.41％,说明CA-SGP显著促进MC3T3-E1细胞增殖、分化和矿化.结论:CA-SGP为富含Neu5Ac的糖蛋白,具有显著促进MC3T3-E1细胞增殖、分化和矿化的作用,对开发抗骨质疏松功能性食品具有重要意义.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	薛长湖	中国海洋大学食品科学与工程学院	475	6355	39.0	54.0
2	王静凤	中国海洋大学食品科学与工程学院	147	1461	22.0	31.0
3	贺敏	中国海洋大学食品科学与工程学院	8	22	3.0	4.0
4	夏光华	中国海洋大学食品科学与工程学院	1	7	1.0	1.0
5	詹麒平	中国海洋大学食品科学与工程学院	7	34	3.0	5.0