靶向端粒酶反转录酶基因短发夹RNA载体的构建

• 作者: 宋扬 徐韬 杨明坤 盛伟斌
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 组织构建 组织工程 RNA干扰 端粒酶 端粒酶反转录酶 质粒载体 星形胶质细胞 短发夹RNA 脊髓损伤 胶质瘢痕 国家自然科学基金
• 年，卷（期）: 2014,（7）
• 所属期刊栏目: 技术与方法 -- 组织构建细胞学实验
• 页码范围: 1057-1062
• 页数: 6页
• 分类号: R318
• 字数: 7284字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2014.07.013

摘要

背景：端粒酶反转录酶对端粒酶活化起重要作用。<br>　　目的：利用pLentilox3.7.U6载体构建靶向大鼠脊髓星形胶质细胞端粒酶反转录酶基因的短发夹RNA干扰分子表达载体并鉴定其作用。<br>　　方法：选择端粒酶反转录酶基因上两段序列体外合成RNA干扰分子的正义链和反义链模板序列，经退火成互补双链，与线性化pLentilox3.7.U6载体连接、转化大肠杆菌和序列测定，应用蛋白质印迹和免疫荧光技术，在体外培养的大鼠脊髓星形胶质细胞模型上验证构建的干扰载体抑制端粒酶反转录酶基因表达的效果。<br>　　结果与结论：蛋白质印迹和免疫荧光检测结果表明，重组质粒干扰组中星形胶质细胞端粒酶反转录酶均呈低表达。结果证实，实验成功构建了针对大鼠脊髓星形胶质细胞端粒酶反转录酶基因的短发夹RNA质粒表达载体，此载体能有效抑制体外培养的大鼠脊髓星形胶质细胞端粒酶反转录酶的表达。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	盛伟斌	新疆医科大学第一附属医院脊柱外科	155	985	15.0	21.0
2	杨明坤	四川省巴中市中心医院骨科	9	20	3.0	4.0
3	徐韬	新疆医科大学第一附属医院脊柱外科	40	170	9.0	11.0
4	宋扬	新疆医科大学第一附属医院脊柱外科	2	9	2.0	2.0