microRNA 在柯萨奇 B3病毒诱导的心肌微血管内皮细胞凋亡中的差异表达

• 作者: 王兴冈 虞勇 虞莹 邹云增 陈瑞珍
• 来源期刊: 中华临床医师杂志（电子版）
• 关键词: 柯萨奇B3病毒 心脏微血管内皮细胞 miRNA21
• 年，卷（期）: 2014,（21）
• 所属期刊栏目: 基础论著
• 页码范围: 3850-3856
• 页数: 7页
• 字数: 4707字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3877/cma.j.issn.1674-0785.2014.21.024

摘要

目的：本研究通过体外培养心脏微血管内皮细胞（CMVECs），经柯萨奇 B3病毒（CVB3）感染后，利用miRNA寡核苷酸基因芯片技术筛选差异表达的miRNAs，进一步探讨miRNA在 CVB3诱导 CMVECs 凋亡中的潜在作用机制。方法原代分离培养大鼠 CMVECs 细胞，以100TCID50CVB3病毒感染48 h 后检测Caspase-3活性和细胞凋亡；提取CMVECs细胞RNA，用Agilent大鼠miRNA寡核苷酸基因芯片进行检测，并通过TargetScan、miranda、mirbase和mirdb数据库选取出差异表达明显并与心血管疾病相关的miRNA，经qPCR对其进行验证，通过生物信息学分析预测其调控靶基因；合成miRNA21 mimics转染CMVECs细胞，同时合成miRNA21 inhibitor，与 CVB3共转染 CMVECs 细胞，检测各组细胞 Caspase-3活性变化和细胞凋亡。结果 CVB3感染CMVECs细胞48 h后与正常对照组比较Caspase-3活性显著上调（P＜0.01），细胞凋亡明显增加；通过基因芯片检测及生物信息学分析后发现，与心血管系统疾病密切相关的miRNA为miRNA21，经qPCR验证结果一致，预测其靶基因为PDCD4；miRNA21mimics转染CMVECs细胞后与正常对照组相比Caspase-3活性显著上调，细胞凋亡增加（P＜0.05）；而miRNA21 inhibitor与CVB3共转染 CMVECs 细胞后与 CVB3感染组相比 Caspase-3活性显著下调，细胞凋亡明显减少（P＜0.05）。结论 miRNA21在CVB3感染的CMVECs细胞中的表达有显著变化，并与CMVECs细胞凋亡密切相关，提示miRNA21在CVB3诱导的病毒性心肌炎发病过程中可能起着重要作用。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邹云增	复旦大学附属中山医院心内科上海市心血管病研究所卫生部病毒性心脏病重点实验室	74	253	9.0	13.0
2	虞莹	复旦大学附属中山医院心内科上海市心血管病研究所卫生部病毒性心脏病重点实验室	7	24	2.0	4.0
3	虞勇	复旦大学附属中山医院心内科上海市心血管病研究所卫生部病毒性心脏病重点实验室	16	77	6.0	7.0
4	王兴冈	复旦大学附属中山医院心内科上海市心血管病研究所卫生部病毒性心脏病重点实验室	1	4	1.0	1.0