胆囊收缩素对人胆管癌QBC939细胞分泌MMPs、TIMPs水平的影响

• 作者: 孙海 张丰深 杨星 邓小明 陈焱
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 胆囊收缩素 基质金属蛋白酶 胆管癌 周围神经浸润
• 年，卷（期）: 2014,（16）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1684-1688
• 分类号: R345|R735.8|R977.1
• 语种: 中文

摘要

目的 观察胆囊收缩素(cholecystokinin,CCK)对人胆管癌QBC939细胞基质金属蛋白酶(mtrix metalloproteinases,MMPs)及其内源性组织抑制剂(tissue inhibitors of matrix metalloproteinases,TIMPs)表达的影响,阐明CCK促进胆管癌周围神经浸润(perineural invasion,PNI)可能的分子机制.方法 将人胆管癌QBC939细胞分为对照组与实验组.对照组为未经处理的胆管癌细胞QBC939;实验1～8组分别加入10-13、10-11、10-9、10-7 mol/L CCK8s,10-7 moL/L L18(CCK-A受体拮抗剂)、10-7 mol/L L50(CCK-B受体拮抗剂)、10-7 mol/L CCK8s+10-7mol/L L18、10-7 mol/L CCK8s+10-7 mol/LL50的QBC939,孵育48 h,采用Transwell细胞侵袭实验比较各组QBC939细胞侵袭能力的差异,并用Real-time PCR和Western blot检测各组MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2 mRNA和蛋白表达情况.各组间比较采用方差分析,采用Spearman法进行相关性检验.结果 CCK8s能够明显促进QBC939细胞的侵袭能力,L18及L60均能明显减弱CCK8s对QBC939细胞的作用.与对照组相比,实验1～4组MMP-2及MMP-9 mRNA和蛋白的表达水平明显升高(P＜0.01),TIMP-1及TIMP-2mRNA和蛋白的表达水平明显降低(P＜0.01);实验5～6组MMP-2及MMP-9 mRNA和蛋白的表达水平明显降低(P＜0.01),TIMP-1及TIMP-2 mRNA和蛋白的表达水平明显升高(P＜0.01);实验7～8组MMPs及TIMPs mRNA和蛋白表达水平与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).实验1～4组MMP-2 mRNA和蛋白的表达水平与CCK浓度呈正相关(相关系数r分别为0.972、0.963,P＜0.01),而TIMP4 mRNA和蛋白的表达水平与CCK浓度呈负相关(相关系数r分别为-0.974、-0.952,P＜0.01).MMP-9、TIMP-1的变化与CCK浓度间无明显相关性;实验组5与实验组6比较、实验组7与实验组8比较,MMP-2、MMP-9、TIMP-1及TIMP-2 mRNA和蛋白表达水平差异无统计学意义(P＞0.05).结论 CCK能明显促进QBC939细胞侵袭能力及MMPs的表达、降低TIMPs的表达,可能主要通过影响MMP-2、TIMP-2平衡的途径增加胆管癌细胞的侵袭能力从而促进胆管癌的PNI.