低氧诱导因子-1α基因Asn803位点在人骨髓间充质干细胞分化成心肌细胞中的作用

• 作者: 刘城 吴平生 王月刚 裴静娴 赖艳娴
• 来源期刊: 广东医学
• 关键词: 低氧诱导因子1α Asn803位点 人骨髓间充质干细胞 心肌细胞
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 25-28
• 页数: 4页
• 字数: 3666字
• 语种: 中文

摘要

目的 研究低氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因Asn803位点在人骨髓间充质干细胞(hMSCs)分化成心肌细胞中的作用.方法 将重组腺病毒Ad-LacZ、Ad-HIF-1αnative、Ad-HIF-1α564、Ad-HIF-1α564/402及Ad-HIF-1α564/803分别以最佳转染复数转染体外5-氮胞苷(5- aza)诱导的hMSCs,于诱导培养后第6周,(1)提取细胞浆蛋白,应用酶联免疫分析检测心肌肌钙蛋白I(cTnI)含量,Western blot测定HIF-1α及血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达水平;(2)更换含有120 μmol/L姜黄素的心肌细胞诱导液培养1 h,后用心肌细胞诱导液继续培养11 h,接着用RT-PCR检测细胞中VEGF mRNA表达水平的变化.结果 hMSCs 经5-aza 诱导6周后,对照组、Ad-LacZ组、Ad-HIF-1αnative组、Ad-HIF-1α564组、Ad-HIF-1α564/402组及Ad-HIF-1α564/803组cTnI值分别为0.690±0.019、0.699±0.007、0.736±0.007、0.748±0.008、0.771±0.008及0.814±0.012(P<0.05),其中以Ad-HIF-1α564/803组cTnI表达水平最高(P<0.05).Western blot结果显示:与Ad-LacZ组相比,Ad-HIF-1αnative组、Ad-HIF-1α564组、Ad-HIF-1α564/402组、Ad-HIF-1α564/803组HIF-1α及VEGF蛋白均明显升高(P<0.05),其中以Ad-HIF-1α564/402组HIF-1α蛋白表达水平最高(P<0.05),以Ad-HIF-1α564/803组VEGF蛋白表达水平最高(P<0.05).RT-PCR检测结果显示:经120 μmol/L姜黄素抑制后VEGF mRNA表达水平较未抑制组平均减少了(50.9±4.6)%.然而,在CBP/p300活性受同等抑制条件下,Pro564 Asn803双突变型HIF-1α基因组VEGF mRNA表达水平虽然较未抑制组减少了约40%,但仍显著高于Pro564单突变型HIF-1α基因组(P<0.05).结论 HIF-1α基因Asn803位点在HIF-1α促进hMSCs向心肌细胞分化中起关键作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	裴静娴	广州医科大学附属广州市第一人民医院心血管内科	4	7	2.0	2.0
2	刘城	广州医科大学附属广州市第一人民医院心血管内科	5	8	2.0	2.0
3	吴平生	广州医科大学附属广州市第一人民医院心血管内科	2	5	2.0	2.0
4	王月刚	广州医科大学附属广州市第一人民医院心血管内科	2	5	2.0	2.0
5	赖艳娴	广州医科大学附属广州市第一人民医院心血管内科	2	5	2.0	2.0