成纤维细胞与脱细胞真皮基质复合培养的实验研究

• 作者: 何洪彬 孙瑞军 孙红 肖芳 车鹏程
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 成纤维细胞 高渗盐-氢氧化钠消蚀法 脱细胞真皮基质 生物相容性
• 年，卷（期）: 2014,（27）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 29-33
• 页数: 5页
• 分类号: R329.2
• 字数: 3979字
• 语种: 中文

摘要

目的 本研究用酶消化法体外培养高纯度的人皮肤成纤维细胞(FB),将FB与高渗盐-氢氧化钠(NaCl-NaOH)消蚀法制作的人脱细胞真皮基质(ADM)复合培养并评价其生物相容性.方法 中性蛋白酶-Ⅰ型胶原酶消化法体外培养人FB,通过组织学方法鉴定其纯度.携带绿色荧光蛋白基因的腺病毒(Ad-GFP)转染人FB,组织学方法观察荧光蛋白的表达情况,流式细胞仪检测转染比例.将FB和Ad-GFP转染的FB接种在NaCL-NaOH消蚀法制作的人ADM上,组织学方法观察细胞的生长和增殖情况;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测ADM内FB角质细胞生长因子(KGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF) mRNA的蛋白表达.结果 体外培养的人FB形态为细长梭形,有较长的突起和明显的核分裂相,波形蛋白、Ⅰ型胶原蛋白、Ⅲ型胶原蛋白的表达均为阳性.Ad-GFP转染FB的比例为72％.复合培养显示人FB不仅黏附在ADM表面,还可以较为均匀地在ADM天然孔隙中生长和增殖;与正常FB比较,ADM内FB KGF、bFGF mRNA的蛋白表达无明显变化.结论 中性蛋白酶-Ⅰ型胶原酶消化法体外可以培养出高纯度的人FB.Ad-GFP转染FB获得成功.NaCL-NaOH消蚀法制作的ADM蕴含丰富的生物信息,FB作为种子细胞与其生物相容性好,为进一步开展皮肤创伤修复的实验研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙红	河北联合大学基础医学院	35	204	10.0	12.0
2	肖芳	河北联合大学基础医学院	5	8	2.0	2.0
3	车鹏程	河北联合大学基础医学院	8	31	3.0	5.0
4	何洪彬	秦皇岛市第一人民医院烧伤科	7	45	4.0	6.0
5	孙瑞军	河北联合大学基础医学院	7	8	2.0	2.0