目的:建立一种检测马尔尼菲青霉菌的实时荧光定量PCR的方法.方法:针对马尔尼菲青霉菌5.8S rRNA设计特异性PCR引物,采用核酸荧光染料SYBR Green Ⅰ进行实时荧光定量PCR检测,探讨该方法的灵敏度和特异性,并进行临床样品检测验证.结果:该方法的特异性较好,与该菌属内的其他细菌间无交叉反应;灵敏度可检测出10个细胞/mL全血,在检测范围内线性良好,相关系数R2=0.981.临床样品检测和传统的培养方法结果完全相符.结论:该方法特异性好,灵敏度高,操作简单,检测时间短;临床样品检测具有很好的准确性,从本研究的结果显示实时荧光定量PCR方法在检测马尔尼菲青霉菌中的应用可以大大缩短临床的诊断时间,提高临床诊断的准确度和效率.