赤子爱胜蚓核酸酶样蛋白的一级结构特征

• 作者: 于保锋 刘志贞 张悦红 牛勃 王建华 程牛亮 解军
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 组织构建 组织工程 赤子爱胜蚓 核酸酶样蛋白 一级结构 质谱 二硫键 国家自然科学基金
• 年，卷（期）: 2014,（15）
• 所属期刊栏目: 技术与方法 -- 组织构建基础实验
• 页码范围: 2390-2396
• 页数: 7页
• 分类号: R318
• 字数: 6462字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2014.15.016

摘要

背景：前期研究从赤子爱胜蚓组织中获得一组核酸酶样蛋白，对该组核酸酶样蛋白的一级结构进行研究，有利于揭示其结构的基本性质，为进一步结构与功能的研究奠定基础。<br>　　目的：对核酸酶样蛋白EWD1和EWD2进行一级结构的测定。<br>　　方法：采用Edman降解法测定EWD1和EWD2的N末端氨基酸序列，采用酸水解法测定其氨基酸组成， LC-MS/MS测定蛋白质内部分氨基酸的序列，MALDI-TOF-MS测定蛋白的含糖量和二硫键数目。<br>　　结果与结论：核酸酶样蛋白EWD1和EWD2的氨基酸组成中，天冬氨酸和天冬酰胺之和的含量最高，都达到近10%，疏水氨基酸亮氨酸的含量也较高，半胱氨酸含量较少，氨基酸组成比较显示，该2种酶与其它核酸酶较相似。Edman降解法测定，EWD1蛋白大亚基的N末端6个氨基酸序列为：D、E、W、V、Y、P，EWD2蛋白的N末端9个氨基酸序列为：L、L、G、P、Y、K、P、K、C；串，联质谱的结果提示2种核酸酶为新蛋白；MALDI-TOF-MS法显示1号核酸酶中含有8个半胱氨酸，形成4对二硫键，2号核酸酶中有6个半胱氨酸，形成3对二硫键。EWD1，2均为糖蛋白，EWD1中的含糖量为17.3%，EWD2蛋白中的含糖量为15.6%。