携带CXCR4基因慢病毒载体转染大鼠骨髓间充质干细胞的体外实验

• 作者: 刘龙 曹志强 王阳
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 干细胞 骨髓干细胞 慢病毒 骨髓间充质干细胞 CXCR4 细胞增殖 免疫调节因子 辽宁省自然科学基金
• 年，卷（期）: 2014,（41）
• 所属期刊栏目: 研究与报告 -- 骨髓干细胞
• 页码范围: 6585-6590
• 页数: 6页
• 分类号: R394.2
• 字数: 6595字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2014.41.005

摘要

背景：间充质干细胞在体内归巢主要调控因子是CXCR4，如何提高干细胞自身CXCR4的表达量是调节干细胞体内靶器官归巢能力的关键。<br>　　目的：构建CXCR4或GFP基因慢病毒表达载体，并观察其对骨髓间充质干细胞自身生长特性及分泌功能的影响。<br>　　方法：骨髓间充质干细胞应用慢病毒载体转染系统转染CXCR4基因达到过表达，同时单独转GFP基因作为对照。通过荧光显微镜、RT-PCR、免疫蛋白印迹方法验证病毒转染效率；流式细胞技术测定骨髓间充质干细胞的增殖、凋亡情况；Western Blot法测定间充质干细胞培养基上清中分泌蛋白及细胞因子变化。<br>　　结果与结论：慢病毒转染系统可以安全、有效地转染CXCR4基因或GFP基因到骨髓间充质干细胞。流式细胞仪检测显示过表达CXCR4的骨髓间充质干细胞增殖能力、生存能力加强，凋亡细胞减少(P<0.05)；细胞上清蛋白分析提示过表达CXCR4后，骨髓间充质干细胞培养上清内出现很多的蛋白因子升高(P<0.05)，其中大多数对细胞自身复制及免疫调节有益。结果表明慢病毒转染是一种安全高效的基因修饰手段，可以通过CXCR4基因修饰的方法提高骨髓间充质干细胞的生存能力、降低凋亡率，调节细胞保护性因子及免疫调节因子的分泌功能。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘龙	解放军沈阳军区总医院泌尿男科	14	50	4.0	7.0
2	曹志强	解放军沈阳军区总医院泌尿男科	5	9	2.0	3.0
3	王阳	解放军沈阳军区总医院泌尿男科	2	4	1.0	2.0