哈茨木霉产水解热凝胶的内切β-1,3-葡聚糖酶的分离纯化

• 作者: 张洪涛 徐敏 朱莉 李晶 李珊 詹晓北 郑志永
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 工学
• 关键词: 哈茨木霉 β-1,3-葡聚糖内切酶 热凝胶 分离纯化
• 年，卷（期）: 2014,（12）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 157-161
• 分类号: TS201.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2014.12.025

摘要

结合多种分离方法,从哈茨木霉(Trichoderma harzianum Rifai ACCC30371)的发酵产物中分离得到一种对不溶性多糖热凝胶具有较高水解活性的内切β-1,3-葡聚糖酶.结果表明,哈茨木霉发酵液经50％饱和度硫酸铵沉淀预处理后,依次经过HiPrep 26/10 desahing层析柱脱盐、QFF阴离子交换层析柱去除杂质蛋白,最终经Superdex 75凝胶柱纯化获得纯度较高的内切β-1,3-葡聚糖酶.最终酶活回收率为6.63％,内切酶比酶活由6.86U/mg提高到133.01U/mg,纯化倍数达到19.39倍.MALDI-TOF-TOF鉴定结果表明,该内切酶与产自绿色木霉的endoglucanase存在较高的同源性.