小鼠附睾脂肪干细胞的分离培养及鉴定

• 作者: 季佳霖 崔新明 张祺 张鉴清 李艳茹
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 干细胞 脂肪干细胞 小鼠 附睾 脂肪组织 差速贴壁 培养
• 年，卷（期）: 2014,（28）
• 所属期刊栏目: 研究与报告 -- 脐带脐血干细胞
• 页码范围: 4535-4541
• 页数: 7页
• 分类号: R394.2
• 字数: 8210字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2014.28.018

摘要

背景：脂肪干细胞作为一种新的成体干细胞，具有来源丰富、取材容易、增殖能力强等优点，受到人们越来越多地关注。目的：体外分离培养小鼠附睾脂肪组织中的脂肪干细胞，并鉴定其生物学特性。方法：无菌切取小鼠附睾处脂肪组织，采用胶原酶进行消化，利用1次消化多次收集与差速贴壁法分离纯化脂肪干细胞。倒置显微镜及透射电子显微镜观察脂肪干细胞的形态。绘制脂肪干细胞的生长曲线。流式细胞术检测脂肪干细胞的免疫表型。加入细胞诱导剂对脂肪干细胞进行成骨及成脂肪的诱导分化。扫描电子显微镜观察脂肪干细胞与胶原支架材料的相容性。结果与结论：倒置显微镜下可见脂肪干细胞呈长梭形或成纤维细胞样，密集排列成漩涡状或成束状交织，可在体外稳定传至第9代。透射电子显微镜下可见脂肪干细胞表面有丰富的微绒毛结构，细胞核体积大，细胞质内可见线粒体、粗面内质网等细胞器。脂肪干细胞表达CD44、CD29，不表达CD34。经成脂肪诱导剂诱导后，多数脂肪干细胞胞质内可见小脂滴，油红O染色可将小脂滴染成红色。经成骨诱导剂诱导后，在脂肪干细胞生长密集区域内的细胞结构模糊、细胞间界限不清楚。经茜素红染色后，可见较多大小不一的折光率较强颗粒状结构沉积。扫描电子显微镜观察到脂肪干细胞呈铺展状生长于胶原支架材料上。结果表明该方法分离出的脂肪干细胞能在体外扩增并稳定传代，在一定诱导条件下，能够分化为成骨细胞和脂肪细胞并且与胶原支架具有良好的相容性。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	崔新明	吉林大学病理生物学教育部重点实验室吉林大学基础医学院病理学系	43	257	9.0	13.0
2	李艳茹	吉林大学病理生物学教育部重点实验室吉林大学基础医学院病理学系	47	178	7.0	10.0
3	张鉴清		10	35	3.0	5.0
4	季佳霖	吉林大学病理生物学教育部重点实验室吉林大学基础医学院病理学系	1	5	1.0	1.0
5	张祺		1	5	1.0	1.0