携带低氧诱导因子1α慢病毒感染大鼠骨髓间充质干细胞后成骨基因的表达

• 作者: 付志杰 何美建 张巨峰 李庆庆 李文翠 段莉 熊建义 王大平 陈洁琳
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 干细胞 骨髓干细胞 低氧诱导因子1α 骨髓间充质干细胞 基因转染 骨缺损 慢病毒载体 骨组织工程 成骨基因 成骨活性 广东省自然科学基金
• 年，卷（期）: 2014,（28）
• 所属期刊栏目: 研究与报告 -- 骨髓干细胞
• 页码范围: 4455-4462
• 页数: 8页
• 分类号: R394.2
• 字数: 8967字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2014.28.005

摘要

背景：人低氧诱导因子1α可调控其下游成骨及成血管基因的表达，具有提高成骨活性的作用。目的：观察携带人低氧诱导因子1α慢病毒感染的大鼠骨髓间充质干细胞中成骨基因表达情况。方法：通过RT-PCR方法从Hela细胞中获得低氧诱导因子1α，构建携带低氧诱导因子1α的慢病毒表达质粒Lenti-HIF-1α-eGFP，与LentiPac HIV混合包装质粒共包装293Ta细胞，获得病毒；采用全骨髓直接贴壁法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞，使用流式细胞仪对骨髓间充质干细胞进行鉴定。分别在慢病毒感染骨髓间充质干细胞1，4，7，14 d后，用实时荧光定量PCR检测骨髓间充质干细胞中成骨基因骨形态发生蛋白2、骨钙蛋白、骨桥蛋白、碱性磷酸酶的表达水平。结果与结论：Lenti-HIF-1α-eGFP有效地感染骨髓间充质干细胞，实时荧光定量PCR检测结果显示成骨基因骨形态发生蛋白2、骨钙蛋白、骨桥蛋白、碱性磷酸酶在Lenti-HIF-1α-eGFP感染后第4天开始明显过表达，且持续至14 d。结果表明低氧诱导因子1α可以提高骨髓间充质干细胞的成骨活性。