高表达重组人组织激肽释放酶7基因的前列腺癌单克隆细胞株的构建

• 作者: 宣强 张悦宁 张成东 杨小丽 林志弟 滕若冰 莫曾南 莫林键
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: 重组人组织激肽释放酶基因7 前列腺癌 稳定细胞株 真核表达载体
• 年，卷（期）: 2014,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1-3
• 页数: 3页
• 分类号: R697.3-35
• 字数: 2009字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2014.10.001

摘要

目的：建立稳定高表达重组人组织激肽释放酶7基因（ KLK7）的前列腺癌细胞株DU145，为前列腺癌发生机制的研究奠定基础。方法 PCR法扩增KLK7 cDNA，并克隆到真核表达载体pcDNA3．1上；经过限制性内切酶酶切、DNA测序验证正确后，以脂质体法转染人前列腺癌DU145细胞；通过G418筛选，每个单克隆细胞扩大培养，建立稳定转染KLK7的DU145单克隆细胞株。采用Western blot 法检测DU145细胞株KLK7表达。结果酶切鉴定及DNA 测序分析显示 pcDNA3．1-KLK7真核表达载体成功构建；转染后，成功获得稳定高表达KLK7的DU145单克隆细胞株。 Western blot 结果显示，pcDNA3．1-KLK7转染的DU145细胞KLK7表达量明显高于转染空载体组细胞（P＜0．01）。结论 pcDNA3．1-KLK7真核表达载体的建立及稳定高表达KLK7的前列腺癌单克隆细胞株的建立，为研究KLK7在前列腺癌发生发展中的作用提供了条件。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宣强	广西医科大学第一附属医院	11	40	4.0	6.0
2	莫曾南	广西医科大学第一附属医院	145	828	13.0	23.0
3	杨小丽	广西医科大学第一附属医院	23	79	6.0	7.0
7	莫林键	广西医科大学第一附属医院	13	45	4.0	6.0
8	滕若冰	广西医科大学第一附属医院	9	21	3.0	4.0
9	林志弟	广西医科大学第一附属医院	1	0	0.0	0.0
10	张成东	广西医科大学医学科学实验中心	1	0	0.0	0.0
11	张悦宁	广西医科大学医学科学实验中心	1	0	0.0	0.0