细胞质膜微囊蛋白1敲除小鼠神经干细胞培养与生物学特性

• 作者: 俞悦 刘柏炎 易健 蔡光先 陈雪梅
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 干细胞 培养 神经干细胞 细胞质膜微囊蛋白1 生物学特性 C57BL/6胎鼠 国家自然科学基金
• 年，卷（期）: 2014,（23）
• 所属期刊栏目: 技术与方法 -- 干细胞培养与分化
• 页码范围: 3739-3744
• 页数: 6页
• 分类号: R394.2
• 字数: 6117字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2014.23.022

摘要

背景：研究发现细胞质膜微囊蛋白1在哺乳动物脑内表达，参与脑的正常发育，能影响脑内神经干细胞的增殖。目的：从细胞质膜微囊蛋白1敲除小鼠脑内获取神经干细胞并观察其生物学特性。方法：分别取E14-E16正常C57BL/6胚胎小鼠和细胞质膜微囊蛋白1敲除C57BL/6胚胎小鼠全脑，采用酶消化法获得单细胞悬液，置神经干细胞条件培养基中培养，原代培养7 d后，加入含体积分数10%胎牛血清的DMEM/F12培养基诱导7 d。结果与结论：从两种胎鼠脑内获取的细胞悬液培养1d后较多细胞发生死亡，可见单个细胞漂浮于培基中，透光度较好，3 d后逐渐形成悬浮生长的多细胞团。传代后培养板底部可见少量细胞发生贴壁，7 d后可见大量细胞团出现，且细胞质膜微囊蛋白1敲除胎鼠源细胞增殖速度更明显。免疫细胞化学检测显示，两种胎鼠来源细胞团均为巢蛋白阳性，分化细胞可见神经丝蛋白200、胶质纤维酸性蛋白或O4阳性表达；正常C57BL/6胎鼠来源细胞团呈细胞质膜微囊蛋白1阳性表达，而细胞质膜微囊蛋白1敲除C57BL/6胎鼠来源细胞团呈细胞质膜微囊蛋白1表达阴性，且神经干细胞成球速度和成球数量优于正常胎鼠神经干细胞。说明实验成功从细胞质膜微囊蛋白1敲除胎鼠脑内培养出细胞质膜微囊蛋白1缺失神经干细胞，细胞质膜微囊蛋白1可促进神经干细胞的增殖，并抑制其分化。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蔡光先		298	2636	24.0	34.0
2	刘柏炎		127	1268	19.0	28.0
4	陈雪梅		17	188	8.0	13.0
5	俞悦		5	30	2.0	5.0
6	易健		74	457	13.0	17.0