小鼠精原干细胞体外培养诱导成骨的能力

• 作者: 孙新明 李伟 杨赣军 胡红梅 蒋芬
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 干细胞 培养 精原干细胞 成骨能力 诱导 生物学特性 种子细胞
• 年，卷（期）: 2014,（23）
• 所属期刊栏目: 技术与方法 -- 干细胞培养与分化
• 页码范围: 3702-3706
• 页数: 5页
• 分类号: R394.2
• 字数: 5816字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2014.23.016

摘要

背景：精原干细胞具有自我更新及多向分化潜能，并可将其体外定向诱导为特异性细胞，提示精原干细胞亦可能具有向成骨细胞转化的可能性，但有关这方面的研究尚未见报道。目的：观察小鼠精原干细胞在体外成骨细胞培养条件下的生物学特征变化。方法：取生后15-20 d小鼠胫骨骨髓，分离、培养骨髓基质细胞，5 d后丝裂霉素C处理制备成饲养层；取生后七至八天小鼠睾丸，经酶消化后制成单细胞悬液并接种于饲养层上。3d后实验组和对照组分别用条件培养液和基本培养液进行诱导培养，通过倒置相差显微镜观察培养细胞生长状况及形态变化，并结合碱性磷酸酶染色、Ⅰ型胶原免疫荧光染色等方法进行结果检测。结果与结论：实验组精原干细胞在条件培养液中较对照组细胞贴壁生长快，条件培养3-6d后见细胞生长迅速，呈集落样增长，细胞立体感增强，细胞团、簇的大小继续增加，细胞外基质增多，但未见明显细胞间桥。培养15 d后，对两组细胞进行碱性磷酸酶染色可见胞质、胞膜染为黑色，呈阳性。在荧光显微镜下可见实验组细胞浆内出现绿色荧光，呈阳性荧光反应；对照组细胞呈阴性反应，说明实验组细胞Ⅰ型胶原染色阳性，这与成骨细胞的生物学特性相似。提示精原干细胞在一定的诱导条件下具有成骨能力，有望为骨组织工程学研究提供种子细胞。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李伟	井冈山大学临床医学院口腔系	50	99	5.0	7.0
2	胡红梅	井冈山大学医学院组织胚胎学教研室	49	97	5.0	6.0
3	孙新明	井冈山大学医学院组织胚胎学教研室	15	38	4.0	5.0
4	杨赣军	井冈山大学医学院组织胚胎学教研室	22	58	4.0	6.0
5	蒋芬	井冈山大学医学院组织胚胎学教研室	8	46	3.0	6.0